Определение активности креатинкиназы в крови

Содержание:

Креатинкиназа (КК) – фермент, катализатор реакции образования креатинфосфата с выделением энергии, а также обратной реакции – перехода креатинфосфата в креатинин. Поэтому раньше фермент назывался креатинфосфокиназа (КФК).

В результате образования креатинфосфата происходит выделение энергии, которая необходима для обеспечения мышечных сокращений, содержится она в цитоплазме или митохондриях клеток.

Молекула креатинкиназы состоит из двух частей, это димеры М («muscle» в переводе с английского – мышца) и В («brain» – мозг). В зависимости от комбинации субъединиц образуется три изомера, для каждого из которых характерна локализация в определённом органе:

  • ММ-изофермент – скелетные мышцы и миокард (сердечная мышца),
  • МВ-изофермент – преимущественно миокард,
  • ВВ-изофермент – головной мозг.

Наибольшую ферментативную активность креатинкиназа проявляет в поперечно-полосатых мышцах (скелетная мускулатура), затем в порядке убывания: в миокарде – мышцах беременной матки – мышцах небеременной матки – гладких мышцах.

В крови практически здоровых людей большая часть креатинкиназы (до 98%) представлена ММ-изоферментом из скелетных мышц и миокарда, около 2% приходится на МВ-изофермент, а ВВ-фракция отсутствует.

Попадание в кровь больших количеств креатинкиназы связано с повреждением клеток, которые её содержат. При этом увеличение уровня определенного изофермента позволяет судить о локализации патологического процесса: увеличение ММ-фракции происходит при повреждении мышц скелета, реже при болезнях сердца, МВ-фракции – при повреждении миокарда, а ВВ-фракция возрастает при болезнях мозга, чаще онкологической природы.

Поэтому при увеличении креатинкиназы диагностический поиск направлен на болезни мышц и сердца различного характера – воспаление, ишемия, травма, отравление, нарушение метаболизма, реже — на онкологическую патологию мозга.

Разрушение клеток сердечной мышцы происходит при инфаркте миокарда, когда к ним прекращается доступ кислорода, и они погибают; при миокардитах, миокардиодистрофиях, реже – при токсическом повреждении. Основное клиническое значение имеет повышение креатинкиназы при инфаркте миокарда. Уровень фермента увеличивается уже через 3-4 часа после начала болевого приступа, достигает максимума через 18-30 часов, а через 72 часа от начала заболевания возвращается в норму.

Первоначально тест на определение креатинкиназы применялся для диагностики миопатий. Другие болезни мышц, при которых разрушаются клетки, и креатинкиназа выделяется в кровь – это травмы, пролежни, миодистрофии, опухоли, судороги мышц и чрезмерная физическая активность.

Установлена взаимосвязь уровня креатикиназы с гормонами щитовидной железы: снижение в крови тироксина и трийодтиронина приводит к повышению креатинкиназы.

Болезни печени не сопровождаются увеличением креатинкиназы, даже при массивном разрушении её клеток. Аналогично при инфаркте лёгкого концентрация фермента в крови не изменяется.

Показания к выполнению анализа

Диагностика инфаркта миокарда и контроль его течения.

Болезни скелетных мышц.

Снижение функции щитовидной железы (гипотиреоз).

Подготовка к исследованию

От последнего приёма пищи до взятия крови временной промежуток должен быть более восьми часов.

Накануне исключить из рациона питания жирные продукты, не принимать спиртные напитки.

За 1 час перед взятием крови на анализ нельзя курить.

Не рекомендуется сдавать кровь сразу после выполнения флюорографии, рентгенографии, УЗИ, физиотерапевтических процедур.

Кровь на исследование сдают утром натощак, исключается даже чай или кофе.

Допустимо пить обычную воду.

За 20-30 минут до исследования пациенту рекомендован эмоциональный и физический покой.

Материал для исследования

Интерпретация результатов

Норма:

  • мужчины до 195 Ед/л,
  • женщины до 170 Ед/л.

Повышение:

1. Инфаркт миокарда.

2. Повреждение мышечной ткани:

  • Миодистрофии (мышечная дистрофия Дюшена),
  • Дерматомиозит,
  • Травмы (синдром длительного сдавления, краш-синдром),
  • Состояние после обширных оперативных вмешательств,
  • Пролежни,
  • Сильные мышечные судороги.

3. Интенсивная физическая нагрузка.

4. Частые внутримышечные инъекции обезболивающих или наркотических препаратов.

7. Маниакально-депрессивный психоз.

8. Травмы головы.

9. Острая лучевая болезнь.

11. Злокачественные опухоли — рак кишечника, мочевого пузыря, молочной железы, простаты, лёгкого, матки, печени.

Снижение показателя не имеет диагностической ценности, возможно при малой мышечной массе или сидячем образе жизни.

Выберите беспокоящие вас симптомы, ответьте на вопросы. Выясните, насколько серьезна ваша проблема и нужно ли обращаться к врачу.

Перед использованием информации, предоставляемой сайтом medportal.org, пожалуйста, ознакомьтесь с условиями пользовательского соглашения.

Пользовательское соглашение

Сайт medportal.org предоставляет услуги на условиях, описанных в настоящем документе. Начиная пользоваться веб-сайтом Вы подтверждаете, что ознакомились с условиями настоящего Пользовательского соглашения до начала пользования сайтом, и принимаете все условия данного Соглашения в полном объеме. Пожалуйста, не пользуйтесь веб-сайтом, если Вы не согласны с данными условиями.

Описание услуги

Вся информация, размещённая на сайте, носит справочный характер, информация взята из открытых источников является справочной и не является рекламой. Сайт medportal.org предоставляет услуги, позволяющие Пользователю производить поиск лекарственных средств в данных, полученных от аптек в рамках соглашения между аптеками и сайтом medportal.org. Для удобства пользования сайтом данные по лекарственным средствам, БАД систематизируются и приводятся к единому написанию.

Сайт medportal.org предоставляет услуги, позволяющие Пользователю производить поиск клиник и другой информации медицинского характера.

Ограничение ответственности

Размещенная в результатах поиска информация не является публичной офертой. Администрация сайта medportal.org не гарантирует точность, полноту и (или) актуальность отображаемых данных. Администрация сайта medportal.org не несет ответственности за вред или ущерб, который Вы могли понести от доступа или невозможности доступа к сайту или от использования или невозможности использования данного сайта.

Принимая условия настоящего соглашения, Вы полностью понимаете и соглашаетесь с тем, что:

Информация на сайте носит справочный характер.

Администрация сайта medportal.org не гарантирует отсутствия ошибок и расхождений относительно заявленного на сайте и фактического наличия товара и цен на товар в аптеке.

Пользователь обязуется уточнить интересующую его информацию телефонным звонком в аптеку или использовать предоставленную информацию по своему усмотрению.

Администрация сайта medportal.org не гарантирует отсутствия ошибок и расхождений относительно графика работы клиник, их контактных данных – номеров телефонов и адресов.

Ни Администрация сайта medportal.org, ни какая-либо другая сторона, вовлеченная в процесс предоставления информации, не несет ответственности за вред или ущерб, который Вы могли понести от того, что полностью положились на информацию, изложенную на этом веб-сайте.

Администрация сайта medportal.org предпринимает и обязуется предпринимать в дальнейшем все усилия для минимизации расхождений и ошибок в предоставленной информации.

Администрация сайта medportal.org не гарантирует отсутствия технических сбоев, в том числе в отношении работы программного обеспечения. Администрация сайта medportal.org обязуется в максимально короткие сроки предпринять все усилия для устранения каких-либо сбоев и ошибок в случае их возникновения.

Пользователь предупрежден о том, что Администрация сайта medportal.org не несет ответственности за посещение и использование им внешних ресурсов, ссылки на которые могут содержаться на сайте, не предоставляет одобрения их содержимого и не несет ответственности за их доступность.

Администрация сайта medportal.org оставляет за собой право приостановить действие сайта, частично или полностью изменить его содержание, внести изменения в Пользовательское соглашение. Подобные изменения осуществляются только на усмотрение Администрации без предварительного уведомления Пользователя.

Вы подтверждаете, что ознакомились с условиями настоящего Пользовательского соглашения , и принимаете все условия данного Соглашения в полном объеме.

Рекламная информация, на размещение которой на сайте имеется соответствующее соглашение с рекламодателем, имеет пометку "на правах рекламы".

Определение общей активности креатинкиназы в сыворотке крови кинетическим методом

Принцип метода: Креатинкиназа (КК) катализирует обратимое фосфорилирование АДФ в присутствии креатинфосфата с образованием АТФ и креатина. Фермент гексокиназа (ГК) катализирует фосфорилирование глюкозы АТФ с образованием АДФ и глюкозо-6-фосфата. Затем глюкозо-6-фосфат под действием глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы (Г6ФДГ) окисляется до 6-фосфоглюконата с одновременным восстановлением НАД + до НАДН.

Кинетическое спектрофотометрическое определение активности КК основано на регистрации возрастания оптической плотности анализируемой пробы при длине волны 340 нм. Скорость увеличения оптической плотности пробы при длине волны 340 нм прямо пропорциональна активности КК в ней.

Линейность метода: до 1500 Е/л.

Норма: мужчины – 0-160 Е/л (37С);

женщины – 0-130 Е/л (37С).

У новорожденных уровень КК в 2-3 раза превышает уровень взрослых.

КК в сыворотке сохраняет стабильность при комнатной температуре (18-25С) в течение 48 часов, при температуре хранения 2-8С в течение 1 недели и при замораживании (-20С) в течение 1 месяца в плотно закупоренном флаконе.

Оборудование и реагенты:

Спектрофотометр с термостатированной кюветой, длина волны 340 нм, длина оптического пути 1 см; температура реакции 37С;

Автоматические пипетки на 25 мкл и 1000 мкл;

Рабочий реагент (креатинфосфат – 30 ммоль/л, АДФ – 2,0 ммоль/л, D-глюкоза – 20 ммоль/л, НАД+ — 2,0 ммоль/л, ГК — > 2500 Е/л, Г6ФДГ — > 2000 Е/л, буфер (рН 6,70,1) – 100 ммоль/л).

Рабочий реагент годен для применения, если его оптическая плотность не выше 0,7 ед.опт.плотн. при длине волны 340 нм.

Перед проведением анализа реагенты следует прогреть до температуры измерения (37С).

Добавить в кювету

2. Рабочий реагент

Перемешать содержимое пробирки и включить секундомер. Измерить оптическую плотность пробы против дистиллированной воды при длине 340 нм ровно через 2 мин. Повторить измерение 2 раза с интервалом 1 мин. Рассчитать изменение оптической плотности за каждую минуту а затем вычислить среднее измерение оптической плотности в минуту (о.п./мин).

Расчет по фактору активности КК проводят по формуле:

о.п./мин  1,025  1000

где о.п./мин – среднее изменение опт.плотн. в минуту;

1,025 – общий объем раствора в кювете;

1000 – коэффициент перевода мл в л;

6,22 – коэффициент миллимолярного поглощения НАДН;

0,025 – объем сыворотки в мл;

1,0 – длина оптического пути.

При внесении каких-либо изменений в перечисленные параметры фактор следует пересчитать. Если активность КК превышает 1500 Е/л (точка вне зоны линейности калибровочного графика), анализируемую сыворотку следует развести 1:1 физиологическим раствором и повторить измерение, а полученный результат расчета умножить на 2.

Клинико-диагностическое значение: Повышение активности КК в сыворотке крови может быть следствием повреждения сердечной или скелетной мускулатуры.

При поражении сердечной мышцы (инфаркт миокарда, миокардит, сердечные аритмии, сердечная недостаточность) активность КК может вырасти в 20-30 раз по сравнению с нормой.

При поражении скелетной мускулатуры уровень активности КК возрастает еще больше.

При инфаркте миокарда, как правило, подъем активности КК наступает через 4-8 часов после начала болевого приступа, достигает максимума через 16-36 часов, и нормализуется к 3-6 дню. МВ-фракция КК является высокоспецифичной для сердечной мышцы, ее активность, как правило, значительно повышается при инфаркте миокарда.

Повышение активности КК может быть вызвано и другими причинами, например: употреблением алкоголя, отравлением снотворным, внутривенным введением ряда лекарственных препаратов.

Креатинкиназа
Структура мозговой креатинкиназы человека с АДФ и креатином. PDB 3b6r . [1]
Идентификаторы
Шифр КФ 2.7.3.2
Номер CAS 9001-15-4
Базы ферментов
IntEnz IntEnz view
BRENDA BRENDA entry
ExPASy NiceZyme view
MetaCyc metabolic pathway
KEGG KEGG entry
PRIAM profile
PDB structures RCSB PDB PDBe PDBj PDBsum
Gene Ontology AmiGO • EGO
Поиск
PMC статьи
PubMed статьи
NCBI NCBI proteins
CAS 9001-15-4

Креатинкиназа (креатинфосфокиназа) — это фермент, катализирующий из АТФ и креатина высокоэнергетическое соединение креатинфосфат, который расходуется организмом при увеличенных физических нагрузках. Содержится в клетках сердечной мышцы, скелетной мускулатуры, головного мозга, щитовидной железы, легких. Наибольшее клиническое значение имеют следующие изоферменты (фракции) креатинкиназы: КК-МВ (сердечный изофермент, изменяющийся при повреждении клеток миокарда), КК-ВВ (мозговой изофермент, отражающий патологию клеток головного мозга), КК-ММ (мышечный изофермент, находящийся в скелетных мышцах).

Повышение активности общей креатинкиназы наблюдается при повреждении любых вышеперечисленных клеток и поэтому не является специфичным. Наиболее часто значительное увеличение активности данного фермента отмечается при остром инфаркте миокарда (определение креатинкиназы, и особенно МВ-фракции, широко используется для ранней диагностики инфаркта миокарда, так как её повышение отмечается уже через 2-4 часа после острого болевого приступа; возврат показателя к норме происходит достаточно быстро (на 3-6 сутки), поэтому определение общей креатинкиназы в крови в более поздние сроки для диагностики инфаркта миокарда малоинформативно). Повышение активности креатинкиназы нередко наблюдается и при острых миокардитах, однако является не столь выраженным и держится значительно дольше, чем при инфаркте.

Высокая активность общей креатинкиназы нередко встречается при травматических повреждениях и заболеваниях скелетных мышц (например, при прогрессирующей мышечной дистрофии, миопатии, дерматомиозите), а также при некоторых заболеваниях головного мозга, после хирургических операций, приема больших доз психотропных препаратов и алкоголя, при любых видах шока, гипотиреозе. Снижение уровня креатинкиназы часто выявляется при тиреотоксикозе (повышенный выброс гормонов щитовидной железы).

Содержание

Нормальные показатели для человека (Ед/л) [ править | править код ]

  • мужские показатели от 0 до 6 месяцев Нормальные показатели для черепахи [ править | править код ]

Нормальное содержание креатинкиназы в крови черепахи составляет 490 ед/л [2] .

Нормальные показатели для домашних животных [ править | править код ]

Нормальное содержание креатинфосфокиназы в крови кошек: от 40 до 220 ед/л.

Нормальное содержание креатинфосфокиназы в крови собак: от 32 до 154 ед/л.

Добавить комментарий