Содержание общего холестерина в сыворотке крови здорового человека колеблется в пределах 150-250 мг/дл (среднее значение 200 мг/дл). На эфиры холестерина с жирными кислотами приходится 60-70% от общего холестерина и 30-40%- на свободный холестерин. В сыворотке крови отношение свободного холестерина к эфирообразующему- величина постоянная.
Увеличение содержания холестерина в плазме крови (гиперхолестеринемия) наблюдается при микседеме, менингитах, диабете, атеросклерозе, при некоторых заболеваниях печени. Описана также наследственная гиперхолестеринемия. Снижение содержания холестерина в плазме (гипохолестеринемия) отмечается при хронической сердечной недостаточности, острых инфекционных заболеваниях, острых панкреатитах, гипертиреозе.
Принцип метода. Метод основан на том, что холестерин в присутствии уксусного ангидрида и смеси уксусной и серной кислот образует окрашенные продукты, интенсивность окраски которых определяется колориметрически.
Ход определения. В сухую пробирку (присутствие следов воды мешает развитию окраски) вносят 2 мл рабочего реактива (реактив отмеривают стеклянным цилиндром) и 0,1 мл негемолизированной сыворотки. Сыворотку добавляют медленно, так чтобы она стекала по стенке пробирки. Пробирку энергично встряхивают 10-12 раз и помещают в термостат при 37?С на 20 мин. Для приготовления контрольной пробы (одна-две пробы на группу) в сухую пробирку отмеривают 2 мл рабочего реактива. Окраску растворов измеряют на ФЭКе против контроля с красным светофильтром. Содержание холестерина в пробирках определяют по калибровочной кривой.
Калибровочный график для определения концентрации холестерина.
Оформление работы. Записывают принцип метода, результаты колориметрии, расчеты.
Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:
Лучшие изречения: Для студентов недели бывают четные, нечетные и зачетные. 9152 — 
| 7333 — 
или читать все.
91.146.8.87 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.
Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)
очень нужно
Принцип метода состоит в том, что холестерин окисляется холестеролоксидазой с высвобождением перекиси водорода, которая в присутствии пероксидазы превращает р-аминоатипирин в окрашенное соединение, интенсивность окраски пропорциональна концентрации холестерина.
Реактивы, исследуемый материал1. Рабочий реактив. 2. Стандартный раствор холестерина. 3. Исследуемая сыворотка.
Концентрация холестерина рассчитывается по формуле:
где Соп – концентрация холестерина в исследуемой пробе, Еоп – оптическая плотность исследуемой пробы, Сст – концентрация холестерина в стандартной пробе, Еоп – оптическая плотность стандартной пробы
Нормальный уровень общего холестерина – 140-200 мг/дл или 3,65-5,2 ммоль/л,
При рождении концентрация общего холестерина менее 2,6 ммоль/л, затем она постепенно растет, однако в детстве, как правило не превышает 4,1 ммоль/л.
Повышенная концентрация холестерина крови (гиперхолесетинемия) – это один из главных факторов развития атеросклероза. При оценке зависимости смертности от ИБС и концентрации холестерина с 5,2 до 6,5 ммоль/л, и увеличивается в 4 раза при концентрации холестерина 7,8 ммоль/л.
Европейское общество по борьбе с атеросклерозом разделяет уровень холестерина по степеням тяжести:
легкая гиперхолестеринемия – 200-250 мг/дл (5,2-6,5 ммоль/л).
умеренная гиперхолестеринемия – 250-300 мг/дл (6,5-7,8 ммоль/л).
высокая гиперхолестеринемия – свыше 300 мг/дл (7,8 ммоль/л).
Это имеет значение для оценки степени риска развития атеросклероза и ИБС и, соответственно, определения тактики ведения пациентов.
Однако изолированное определение уровня общего холестерина в настоящее время не рекомендуется проводить, даже для скрининга. Как известно общий холестерин представляет собой суммарную концентрацию холестерина основных классов липопротеинов: ХС-ЛПВП, ХС-ЛПОНП и ХС-ЛПНП. На практике проводится определение общего холестерина, холестерина ЛПВП и триацилглицеринов, на основании полученных результатов расчитывают ХС-ЛПОНП и ХС-ЛПНП (порядок расчета изложен в работе «Расчет индекса атерогенности липидов»). Исходя из полученных результатов, определяют тип гиперлипопротеинемии.
Гиперхолестеринемия может быть первичной или семейной ,обусловлена генетической предрасположенностью (например: из-за отсутствия или недостатка рецепторов к ЛПНП) или преобладанием в рационе продуктов, богатых холестерином (животные жиры, яйца, твердые сыры и др.)
Но значительно чаще встречается вторичная гиперхолестеринемия, т.е. обусловленная различными заболеваниями. Наиболее часто гиперхолестеринемия наблюдается при: гипотериозе, холестазе, ожирении, заболевании почек, сахарном диабете, приеме некоторых лекарственных препаратов (пероральные контрацептивы, гипотензивные препараты и др.)
Гипохолестеринемия – т.е. снижение концентрации менее 3, 65 ммоль/л ( у взрослых) имеет значительно меньшее клинико диагностическое значение, наблюдается при: голодании, злокачественных новообразованиях, гипертиреозе, тяжелых заболеваниях печени и т.д.
по модифицированному методу Златкис-Зака*
Принцип метода: содержащийся в плазме или сыворотке крови свободный и эфирносвязанный холестерин окисляется хлорным железом в присутствии концентрированной серной и ортофосфорной кислот с образованием ненасыщенных продуктов, окрашенных в красно-фиолетовый цвет. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации холестерина (присутствие следов воды мешает развитию окраски !).
Реактивы и оборудование: 1) Реактив для цветной реакции:
● основной раствор красителя (2,5 г хлорного железа растворить в 100 мл ортофосфорной кислоты), ● рабочий раствор красителя (8,0 мл основного раствора развести до 100 мл концентрированной серной
кислотой); 2) этанол; 3) калибровочный раствор холестерина в этаноле,
содержащий 1,6 мг/мл (3 ммоль/л); 4) штатив с химическими пробирками (сухими!); 5) микропипетка для взятия сыворотки на 0,1 мл; 6) пипетка на 2мл; мерная центрифужная пробирка для отмеривания реактива для цветной реакции; 8) фотоэлектроколориметр.
Ход работы: в пробирку прибавляют микропипеткой 0,1 мл сыворотки крови, добавляют 1,4 мл этанола. Осторожно по стенке пробирки добавляют 2,0 мл реактива для цветной реакции, пробу хорошо встряхивают (но осторожно, направляя при этом отверстие пробирки от себя и окружающих), оставляют на 30 минут при комнатной температуре. Развивается красно-фиолетовая окраска. Полученный окрашенный раствор колориметрируют на ФЭКе, против реактивов без добавления сыворотки крови. Светофильтр зеленый (λмакс.= 540 нм). Расчет концентрации холестерина проводится с помощью калибровочной кривой.
содержание холестерина рассчитывают по формуле
Х = С × 100/0,1 = мг% × 0,0258 = ммоль/л, где
0,1 — количество мл сыворотки, взятое на исследование
С — количество холестерина в крови в мг, найденное по калибровочному графику после определения оптической плотности пробы (Д).
Норма содержания холестерина в сыворотке крови 3,6-6,4 ммоль/л.
Тестовый контроль по теме «Обмен холестерина. Липопротеины»
ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:
Лимитирующей стадией биосинтеза холестерина является реакция, в ходе которой образуется:
а) ацетоуксусная кислота (ацетоацетат)
б) β-оксимасляная кислота (β-оксибутират)
д) мевалоновая кислота (мевалонат)
Выберите правильнЫЙ ответ:
Функцией апо А1 является:
а) активация липопротеинлипазы
б) активация лецитинхолестеролацилтрансферазы (ЛХАТ)
в) транспорт эфиров холестерола
г) транспорт триацилглицеролов
д) активация ацилКоАхолестеролацилтрансферазы (АХАТ)
ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:
Транспорт экзогенного холестерина и триацилглицеролов из кишечника в ткани осуществляют:
г) хиломикроны, ЛПОНП, ЛПНП
д) ЛПНП, ЛПОНП, ЛПВП
Выберите правильнЫЙ ответ:
Функцией апо С2 является:
а) активация липопротеинлипазы
б) активация лецитинхолестеролацилтрансферазы (ЛХАТ)
в) транспорт эфиров холестерола
г) транспорт триацилглицеролов
д) активация ацилКоАхолестеролацилтрансферазы (АХАТ)
Тест 5
ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:
Транспорт эндогенного холестерина и триацилглицеролов из печени в ткани осуществляют:
г) хиломикроны, ЛПОНП, ЛПНП
д) ЛПНП, ЛПОНП, ЛПВП
ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:
Транспорт холестерина из внепеченочных тканей в печень осуществляют:
г) хиломикроны, ЛПОНП, ЛПНП
д) ЛПНП, ЛПОНП, ЛПВП.
ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:
Образование ЛПНП происходит:
б) в печени и кишечнике
г) в крови из ЛПОНП
д) в крови из хиломикронов и ЛПОНП
ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:
Наиболее эффективно для оценки степени риска развития атеросклероза является определение содержания в крови:
а) общего уровня холестерина
б) холестерина в ЛПНП
в) холестерина в ЛПВП
г) холестерина в ЛПОНП и ЛПНП
д) соотношение холестерина ЛПОНЛ, ЛПНП к холестерину ЛПВП
ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:
Атерогенными липопротеинами являются:
ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:
Основные этапы синтеза холестерина в клетке имеют общие реакции с:
а) синтезом жирных кислот
б) распадом жирных кислот
в) синтезом фосфолипидов
г) синтезом кетоновых тел
д) синтезом триацилглицеридов
ВыбЕрИтЕ все правильныЕ ответЫ:
Катаболизм холестерина связан с синтезом :
а) тиреоидных гормонов
б) желчных кислот
в) гормонов коры надпочечников
г) гормонов мозгового слоя надпочечников
Выберите все правильныЕ ответЫ:
Коррекция дислипидемии при атеросклерозе проводится лекарственными веществами, которые :
а) ингибируют активность гидроксиметилглутарил-КоА-редуктазы
б) активируют метаболизм ЛПНП
в) угнетают образование ЛПВП
г) угнетают образование ЛПНП
д) обладают антиоксидантным и мембранопротекторным действием
Выберите все правильныЕ ответЫ:
Причинами повышения уровня холестерина в крови являются:
а) нарушение оттока желчи из желчного пузыря
б) нарушение синтеза желчных кислот
в) ингибирование гидроксиметилглутарил-КоА-редуктазы
г) снижение активности лецитинхолестеролацилтрансферазы
д) уменьшение количества или нарушение структуры рецепторов ЛПНП
УСТАНОВИТЕ СТРОГОЕ СООТВЕТСТВИЕ.
Апобелки липопротеинов: Функция апобелка:
1) апо А1 а) кофактор внепеченочной липопротеинлипазы
2) апо С2 б) лиганды рецепторов хиломикрона
3) апо Д в) кофактор лецитинхолестеролацилтрансферазы
4) апо В48 г) транспорт эфиров холестерина
д) кофактор панкреатической липазы
Тест 15
Лимитирующей реакцией синтеза холестерина являетсяобразование ___________, регуляторный фермент — ___________.
(для каждого вопроса – один или несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз).
Изменение активности Регуляторные молекулы
ГМГ-КоА-редуктазы:
1) увеличение а) инсулин
2) снижение б) глюкагон
ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ.
Механизм регуляции ГМГ КоА – редуктазы холестерином:
а) аллостерическая активация
б) ковалентная модификация
в) индукция синтеза
г) репрессия синтеза
д) активация протектором
Тест 18.
ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ.
Коферментом ГМГ КоА-редуктазы(синтез холестерина) является:
Тест 19.
ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ.
Механизм регуляции синтеза В100, Е- рецепторов к ЛПНП холестерином:
а) аллостерическая активация регуляторного фермента
б) ковалентная модификация
в) индукция синтеза
г) репрессия синтеза
д) ингибирование регуляторного фермента по аллостерическому механизму
Тест 20.
ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ.
Промежуточный продукт синтеза холестерина используется организмом для синтеза:
Тест 21.
Регуляторным ферментом превращения холестерина в желчные кислоты является ________________ .
Тест 22.
ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ.
Синтез холестерина в печени увеличивается при диете богатой:
в) животными жирами
г) растительными маслами
УСТАНОВИТЕ СТРОГОЕ СООТВЕТСТВИЕ.
Фермент: Процесс:
1) 7a холестеролгидроксилаза а) синтез эфиров холестерина в клетке
2) АХАТ б) синтез эфиров холестерина в крови
на поверхности ЛПВП
3) 1aхолестеролгидроксилаза в) синтез желчных кислот в печени
4) ЛХАТ г) синтез стероидных гормонов
д) образование активной формы
витамина Д3 в почках
ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ.
Триглицериды хиломикронов и ЛПОНП гидролизуются:
а) панкреатической липазой
Содержание холестерина в крови с возрастом __________________.
Статины снижают активность ГМГ-КоА-редуктазы по механизму ______________ ____________ ингибирования.
(для каждого вопроса – несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз)
| Локализация апобелков: | Апобелки липопротеинов: |
| 1) интегральные 2) периферические | а) апо А б) апо Е в) апо С г) апо Д д) апо В |
УСТАНОВИТЕ ПРАВИЛЬНУЮ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ.
Поступление холестерина из печени в периферические ткани:
а) образование ЛПНП
б) присоединение в крови Апо С к ЛПОНП
в) образование ЛПОНП
г) действие ЛП-липазы
д) захват липопротеинов специфическими рецепторами тканей
ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ.
Функции ЛПВП в крови:
а) транспорт холестерина из внепеченочных тканей в печень
б) снабжение апобелками других ЛП в крови
в) антиоксидантные функции по отношению к модифицированным ЛПНП
г) забирают свободный холестерин и передают эфиры холестерина
д) транспорт холестерина из печени в периферические ткани
ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ.
Факторами риска развития атеросклероза являются:
в) высокое давление
г) снижение массы тела
Ответы по теме: «ОБМЕН ХОЛЕСТЕРИНА.Липопротеины»
1. д 2. б 3. а 4. а
5. б 6. в 7. г 8. д
9. б 10.г 11. б,в,д 12. а,б,г,д
13. а,б,г,д 14. 1в,2а,3г,4б
15. мевалонат, ГМГКоА-редуктаза
16. 1а 2бвгд
17.г
18. б
19. г
20. в
21. 7α-холестеролгидроксилаза
22. б,в
23. 1в, 2а, 3д, 4б
24. в
25. увеличивается
26. конкурентное обратимое
27. 1ад 2бвг
28. вбгад
29. а,б,в,г
30. а,б,в,д
1. Тема 20. Нарушения липидного обмена
Самостоятельная работа студентов в аудиторное время
Место проведения – кафедра биохимии
Продолжительность занятия – 180 мин.
2. Цель занятия:научить студентов самостоятельной работе со специальной и справочной литературой по предложенной теме посредством решения ситуационных задач, аргументировано выступать по конкретным вопросам, дискутировать в кругу своих коллег и отвечать на их вопросы; закрепить знания по теме «Химия и обмен липидов».
3. Конкретные задачи:
3.1. Студент должен знать:
3.1.1. Строение и свойства липидов.
3.1.2. Переваривание липидов в ЖКТ.
3.1.3. Тканевой обмен жирных кислот (окисление и синтез).
3.1.4. Обмен кетоновых тел.
3.1.5. Синтез триглицеридов и фосфолипидов.
3.1.6. Взаимопревращение азотистых спиртов.
3.1.7. Обмен холестерина. Обмен эфиров холестерина.
3.1.8. ЦТК, как единый путь обмена липидов, углеводов и белков.
3.2. Студент должен уметь:
3.2.1. Анализировать, обобщать и излагать материалы литературы.
3.2.2. Обосновывать терапевтические рекомендации на базе знаний о метаболизме веществ в организме.
4. Мотивация: умение правильно адаптировать материалы справочников и журнальных статей необходимо для работы будущего специалиста; знания липидного обмена, обмена кетоновых тел, холестерина в норме и при патологии обязательны для практической работы врача.
5. Задание для самоподготовки: студенты должны изучить рекомендуемую литературу, используя вопросы для самоподготовки.
5.1. Рекомендуемая литература.
5.1.1. Лекционный материал и материалы практических работ по теме "Липиды".
5.1.2. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. "Биологическая химия". – М., Медицина. – 1998. — С.194-203, 283-287, 363-406.
5.1.3. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С.Северина. – М.: ГЭОТАР-Мед., 2003. – С.405-409, 417-431, 437-439, 491.
5.1.4. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Обмен липидов и липопротеинов и его нарушения. Руководство для врачей, СПб. – 1999. – Питер. — 505 с.
5.2. Подготовиться к тестовому контролю.
6. Вопросы для самоподготовки:
6.1. Синтез кетоновых тел, их использование организмом в норме.
6.2. Понятие кетоацидоза. Причины формирования кетоза, защитные
механизмы, предотвращающие гибельные для организма последствия.
6.3. Что такое b-окисление жирных кислот. Необходимые условия для
6.4. Синтез фосфолипидов. Возможности синтеза в организме.
6.5. Взаимопревращение азотистых спиртов.
6.6. Сфинголипидозы, ганглиозидозы. Причины, приводящие к их
6.7. Переваривание липидов в ЖКТ.
6.8. Желчные кислоты. Строение и функции в организме.
6.9. Холестерин. Причины повышения уровня холестерина крови. Синтез, распад и транспорт холестерина.
6.10. Понятие о липопротеинах.
6.11. Причины развития атеросклероза
6.12. Перекисное окисление липидов и биоантиоксиданты.
6.13. Превращения арахидоновой кислоты в организме.
Последнее изменение этой страницы: 2016-04-23; Нарушение авторского права страницы